Real time pcr là gì? Các công bố khoa học về Real time pcr

Real-time PCR (Polymerase Chain Reaction) là một phương pháp phân tích di truyền tồn tại trong việc nhân bản và định lượng DNA hoặc RNA. Phương pháp này được sử dụng phổ biến trong nghiên cứu sinh học phân tử và phân tích gene.

Real-time PCR cho phép người dùng theo dõi quá trình nhân bản DNA hoặc RNA ngay tại thời điểm reaciton diễn ra, nguyên lý hoạt động dựa trên sự thay đổi của một fluorescent dye được thêm vào trong reaciton. Khi enzyme polymerase nhân bản DNA hoặc RNA, nó sẽ tạo ra bản sao của molecule gốc, quá trình này cùng với sự tương tác giữa dye và DNA hoặc RNA sẽ dẫn đến sự phát quang. Sự phát quang này sẽ được đo lường liên tục, mạch-ni-dự tuyến theo thời gian trong suốt quá trình phản ứng, do đó chúng ta có thể biết được số lượng DNA hoặc RNA ban đầu trong mẫu một cách chính xác.

Real-time PCR có rất nhiều ứng dụng trong nghiên cứu và chẩn đoán y tế, như xác định gene quan trọng, theo dõi biểu hiện gen, phát hiện và định lượng virus và vi khuẩn gây bệnh, xác định sự chênh lệch genet ic và nhiều ứng dụng khác.
Real-time PCR là một phương pháp phân tích di truyền dựa trên sự nhân bản và định lượng DNA hoặc RNA. Điều đặc biệt của phương pháp này là nó cho phép người dùng theo dõi quá trình phản ứng diễn ra theo thời gian thực, tức là có thể xem trực tiếp kết quả phản ứng từng chu kỳ nhân bản.

Nguyên tắc hoạt động của real-time PCR dựa trên sự sử dụng một fluorescent dye hoặc probe để theo dõi quá trình nhân bản DNA hoặc RNA. Khi phản ứng PCR diễn ra, enzyme polymerase sẽ nhân bản molecul của DNA hoặc RNA mục tiêu một cách liên tục. Đồng thời, một fluorescent dye hoặc probe được thêm vào trong reaciton sẽ tương tác với molecul DNA hoặc RNA, dẫn đến sự phát quang.

Sự phát quang này sẽ được ghi lại bởi máy PCR specializd được gọi là máy quạt thập tự chủ (thermal cycler) và được giám sát trong suốt quá trình phản ứng. Máy quạt thập tự chủ sẽ thể hiện sự phát quang theo từng chu kỳ nhân bản (cycle). Khi reaciton bắt đầu, sự phát quang ban đầu thấp và sau mỗi chu kỳ nhân bản, nó sẽ tăng lên, vì lượng DNA hoặc RNA càng tăng, sự phát quang càng tăng.

Sau mỗi chu kỳ nhân bản, máy quạt thập tự chủ sẽ đo lường lượng fluorescence hiện tại trong reaciton và biểu thị dữ liệu này trên một đồ thị fluorescence PCR. Dựa trên đường cong này, người dùng có thể xác định số lượng DNA hoặc RNA ban đầu trong mẫu, cũng như theo dõi quá trình gia tăng định lượng của molecul mục tiêu.

Real-time PCR có nhiều ứng dụng quan trọng trong nghiên cứu và chẩn đoán y tế. Nó có thể sử dụng để xác định gene quan trọng, xác định mức độ biểu hiện gen, phát hiện và định lượng virus và vi khuẩn gây bệnh, xác định sự chênh lệch genet ic, theo dõi phản ứng tương tác gen và các quá trình di truyền khác. Real-time PCR cũng được sử dụng trong phân tích kháng nguyên và phát hiện các thay đổi gene liên quan đến bệnh tật.